1.简介

谷物和豆类是人类和动物饮食的主要组成部分。半乳糖基蔗糖（棉籽糖、水苏糖和毛蕊草糖）是许多谷物和豆类的主要成分，谷物豆类的抗营养性通常与这类低聚糖的存在有关。半乳糖基蔗糖在上上部消化道不被水解，而在小肠下端，在细菌作用下被代谢，产生甲烷、氢和二氧化碳，易导致肠胃胀气和腹泻。因此，半乳糖基蔗糖是单胃动物饮食的抑制因子。

从豆类粉中提取半乳糖基蔗糖可以使用集中溶剂，通常为水和酒精的混合物。在提取前将内源性α-半乳糖苷酶和转化酶灭活非常重要。

使用色谱法可以分离并定量检测提取的半乳糖基蔗糖，但是这些方法通常为半定量方法。高效液相色谱法和低压液相色谱法可以定量，但是消耗时间长，尤其是样品提取方面。

众所周知，棉籽糖、水苏糖和毛蕊草糖可以被α-半乳糖苷酶水解为D-半乳糖和果糖。目前，市场上已经有检测棉籽糖的生化试剂盒。这些试剂盒中采用了从绿咖啡豆中提取的α-半乳糖苷酶，能够快速水解棉籽糖，但是对水苏糖和毛蕊草糖的作用非常缓慢，而且在的孵育条件下不能完全水解低聚糖。而Megazyme试剂盒采用来自黑曲霉的酶，能够完全并快速的催化棉籽糖、水苏糖和毛蕊草糖水解为D-葡萄糖和蔗糖。

2.检测原理

在α-半乳糖苷酶和转化酶的作用下，半乳糖基蔗糖水解为D-葡萄糖、D-半乳糖和D-果糖。然后使用葡萄糖氧化酶/过氧化物酶试剂测定D-葡萄糖。该方法无法区分棉籽糖、水苏糖和毛蕊草糖，但是可以作为一个整体检测。1摩尔棉籽糖含有1摩尔D-葡萄糖，浓度以摩尔表示。同时测定样品提取物中的游离蔗糖和D-葡萄糖。